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如何高效做到活細(xì)胞的實時同步對照實驗?

發(fā)布日期: 2022-11-10


一般來說,在做細(xì)胞實驗時會將一個實驗分為實驗組和對照組。實驗組是接受實驗變量處理的對象組;對照組相對實驗組而言,是不接受實驗變量處理的對象組。

理論上,因為實驗組和對照組受到無關(guān)變量的影響相同,所以實驗組和對照組的差異,即可認(rèn)定是來自實驗變量的效果。實驗人員通過設(shè)置實驗組和對照組來加強(qiáng)實驗結(jié)果的可信度,這就要求盡量做到多組、同步進(jìn)行實驗,并可保留相應(yīng)數(shù)據(jù)


01

對照組實驗案例


1、不同藥物對同種細(xì)胞的影響實驗。

用克隆形成實驗檢測嗎啡、舒芬太尼、布托啡諾對人肺癌細(xì)胞A549細(xì)胞株增殖的影響,分別用不同濃度的嗎啡、舒芬太尼和布托啡諾處理A549細(xì)胞7d后,進(jìn)行細(xì)胞克隆形成實驗。




實驗結(jié)果顯示,當(dāng)嗎啡濃度為101umol/L時,A549細(xì)胞的增殖受到抑制,集落單位數(shù)目顯著少于對照組,結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義;其它濃度嗎啡對A549 細(xì)胞的增殖的影響不明顯。不同濃度的舒芬太尼、布托啡諾均顯示陰性結(jié)果,即不同濃度的舒芬太尼、布托啡諾未對A549細(xì)胞的增殖具有顯著影響。


2、同種藥物對不同種細(xì)胞的影響實驗。

為了比較索拉非尼對不同克隆細(xì)胞增殖抑制率,對不同細(xì)胞培養(yǎng)成克隆細(xì)胞群。陰性對照孔只加入培養(yǎng)基,24小時后細(xì)胞貼壁。陽性對照組和陰性對照組均不加藥物索拉非尼,實驗組加入不同濃度藥物索拉非尼。

克隆A(SCLC-1)細(xì)胞體積較小,數(shù)量最多,結(jié)構(gòu)致密;克隆體較大,邊界光滑清楚,細(xì)胞呈巢狀致密排列,約占單克隆生長細(xì)胞孔的13% (2/15)。克隆B(SCLC-2)細(xì)胞呈梭形或多邊形,排列松散,邊界不規(guī)則,約占單克隆生長細(xì)胞孔的87%(13/15)。

克隆A傳代后細(xì)胞分裂增殖旺盛,3-4天即可鋪滿培養(yǎng)瓶壁,連續(xù)傳代3月達(dá)20余代。克隆B傳代則需1周余才可鋪滿培養(yǎng)瓶壁,傳代6-8次后細(xì)胞毛糙,表面見金黃色顆粒物或褐色絮狀物。

加入MTT噻唑蘭檢測細(xì)胞增殖抑制率結(jié)論:索拉非尼對克隆A細(xì)胞抑制率無明顯變化,索拉非尼對克隆B細(xì)胞抑制率有明顯變化。


02

Cellaview賽樂微的對照組實驗


一般來說,實驗室都是靠人工觀測記錄細(xì)胞生長的,需要實驗人員定期將培養(yǎng)中的細(xì)胞取出放在顯微鏡下進(jìn)行觀測并記錄相應(yīng)數(shù)據(jù)。一旦對照組數(shù)量增多,那么人工很難做到多組、同步進(jìn)行觀測記錄并記錄準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。而且,人工頻繁拿出細(xì)胞并觀測的操作,也很容易導(dǎo)致細(xì)胞污染,使得研究前功盡棄。

所以,為解決以上這些實際問題,力顯智能研發(fā)團(tuán)隊綜合研發(fā)了這樣一款細(xì)胞智能監(jiān)控助——Cellaview賽樂微。它的核心優(yōu)勢在于它可以7x24小時的實時智能監(jiān)控并記錄細(xì)胞生長狀態(tài),且因為體積足夠小,能夠直接連同培養(yǎng)皿放進(jìn)培養(yǎng)箱,可以一邊培養(yǎng)一邊觀測,再也不用擔(dān)心頻繁拿取會造成細(xì)胞污染了。


以秋水仙素對海拉細(xì)胞增殖抑制效果實驗為例(30ng/ml濃度秋水仙素),可使用Cellaview賽樂微作如下對照實驗。正常培養(yǎng)的海拉細(xì)胞為對照組、未加藥組(加入等體積30 ng/mLN(yùn)acl處理12h的Hela細(xì)胞)、加藥組(加入30 ng/ml秋水仙素給藥處理12h的Hela細(xì)胞),隨后同步放入培養(yǎng)箱,培養(yǎng)條件 95%CO?、5%O?,37℃。

實驗結(jié)論:秋水仙素對海拉細(xì)胞增殖有著明顯的抑制效果,若想進(jìn)一步探究不同濃度秋水仙素對海拉細(xì)胞增殖的抑制程度,還需要進(jìn)一步作對比試驗。

如上,Cellaview賽樂微很好滿足了對照組實驗多組、同步、可保留數(shù)據(jù)的需求。Cellaview賽樂微的PC端后臺也可支持多達(dá)4臺儀器的同步連接,可以應(yīng)用于不同因素下對同種細(xì)胞的影響同因素下對不同細(xì)胞的影響的類型實驗,可為實驗提供多組同步的對照參考依據(jù),給細(xì)胞實驗研究帶來極大幫助。



Cellaview賽樂微完美適用于細(xì)胞劃痕、匯合度識別、類器官培養(yǎng)監(jiān)測、腫瘤球增殖監(jiān)測、胚胎干細(xì)胞生長監(jiān)測等大多數(shù)細(xì)胞生長研究,為細(xì)胞質(zhì)量控制和監(jiān)控提供了極大幫助。






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