細(xì)胞計(jì)數(shù)作為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的常用手段之一，也是細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一個(gè)基本技能。我們想了解細(xì)胞的生長(zhǎng)情況時(shí)，除了直接觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)以外， 繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn) 、計(jì)算細(xì)胞倍增時(shí)間應(yīng)該就是廣泛采用的評(píng)價(jià)指標(biāo)了。 但其實(shí)使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板手工計(jì)數(shù)細(xì)胞過(guò)程十分繁瑣，對(duì)實(shí)驗(yàn)者操作者的要求也比較嚴(yán)格。

細(xì)胞計(jì)數(shù)的常見(jiàn)方法主要有手動(dòng)計(jì)數(shù)及自動(dòng)計(jì)數(shù)。本期阿顯為您列舉手工計(jì)數(shù)的操作要點(diǎn)以及自動(dòng)計(jì)數(shù)的便捷高效之處，供您按照自身實(shí)際情況選擇！

手動(dòng)計(jì)數(shù)操作要點(diǎn)


1.計(jì)數(shù)板需要清洗干凈，使其干燥，不能有油脂或者灰塵，蓋玻片亦如此，不干凈的計(jì)數(shù)板嚴(yán)重影響計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
2.提前預(yù)估細(xì)胞量，細(xì)胞濃度太低誤差大，細(xì)胞濃度太大容易數(shù)花眼。最好使其濃度在0.5-5x106個(gè)/mL，也就是每個(gè)計(jì)數(shù)室50-500個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞數(shù)目過(guò)多，則需要進(jìn)一步稀釋?zhuān)患?xì)胞數(shù)目過(guò)少，則需要離心再懸浮。
3.盡可能使細(xì)胞分離成單個(gè)，無(wú)團(tuán)塊無(wú)雜質(zhì)；計(jì)數(shù)前快速吹打均勻，尤其是多次取樣計(jì)數(shù)時(shí)更要注意每次都要混勻，操作盡量迅速。
4.細(xì)胞液滴加到計(jì)數(shù)室再蓋蓋玻片，亦可先蓋玻片，從側(cè)面通過(guò)液體毛吸作用到達(dá)計(jì)數(shù)室，液體太多容易測(cè)流到計(jì)數(shù)板小溝，細(xì)胞容易被流走；液體太少容易在計(jì)數(shù)室或者附近形成空泡。如出現(xiàn)以上情況，則需準(zhǔn)備細(xì)胞和計(jì)數(shù)板重新計(jì)數(shù)。
5.數(shù)細(xì)胞的原則是只數(shù)完整的細(xì)胞，若少量細(xì)胞聚集成團(tuán)，只按照一個(gè)細(xì)胞計(jì)算；如果細(xì)胞壓在格線(xiàn)上，則只計(jì)上線(xiàn)，不計(jì)下線(xiàn)，只計(jì)右線(xiàn)，不計(jì)左線(xiàn)。
6.如果細(xì)胞需要臺(tái)盼藍(lán)染色，必須充分混勻并且不要忘記計(jì)算時(shí)乘以倍數(shù)；
7.滴加細(xì)胞過(guò)程中，滴加后移動(dòng)計(jì)數(shù)板以及計(jì)數(shù)過(guò)程中都要保持計(jì)數(shù)板水平不晃動(dòng)，防止細(xì)胞液體側(cè)流帶動(dòng)細(xì)胞流失或者局部聚集。
8.建議細(xì)胞計(jì)數(shù)板上下兩室都計(jì)數(shù)然后取平均或者多次計(jì)數(shù)取平均，準(zhǔn)確的計(jì)數(shù)應(yīng)該是多次計(jì)數(shù)結(jié)果差別很小，或者稀釋一定倍數(shù)后計(jì)數(shù)結(jié)果依然吻合

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