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如何高效做到活細(xì)胞的實(shí)時(shí)同步對(duì)照實(shí)驗(yàn)?

發(fā)布日期: 2022-11-10


一般來(lái)說(shuō),在做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí)會(huì)將一個(gè)實(shí)驗(yàn)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組是接受實(shí)驗(yàn)變量處理的對(duì)象組;對(duì)照組相對(duì)實(shí)驗(yàn)組而言,是不接受實(shí)驗(yàn)變量處理的對(duì)象組。

理論上,因?yàn)閷?shí)驗(yàn)組和對(duì)照組受到無(wú)關(guān)變量的影響相同,所以實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的差異,即可認(rèn)定是來(lái)自實(shí)驗(yàn)變量的效果。實(shí)驗(yàn)人員通過(guò)設(shè)置實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組來(lái)加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度,這就要求盡量做到多組、同步進(jìn)行實(shí)驗(yàn),并可保留相應(yīng)數(shù)據(jù)


01

對(duì)照組實(shí)驗(yàn)案例


1、不同藥物對(duì)同種細(xì)胞的影響實(shí)驗(yàn)。

用克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)嗎啡、舒芬太尼、布托啡諾對(duì)人肺癌細(xì)胞A549細(xì)胞株增殖的影響,分別用不同濃度的嗎啡、舒芬太尼和布托啡諾處理A549細(xì)胞7d后,進(jìn)行細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)。




實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,當(dāng)嗎啡濃度為101umol/L時(shí),A549細(xì)胞的增殖受到抑制,集落單位數(shù)目顯著少于對(duì)照組,結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;其它濃度嗎啡對(duì)A549 細(xì)胞的增殖的影響不明顯。不同濃度的舒芬太尼、布托啡諾均顯示陰性結(jié)果,即不同濃度的舒芬太尼、布托啡諾未對(duì)A549細(xì)胞的增殖具有顯著影響。


2、同種藥物對(duì)不同種細(xì)胞的影響實(shí)驗(yàn)。

為了比較索拉非尼對(duì)不同克隆細(xì)胞增殖抑制率,對(duì)不同細(xì)胞培養(yǎng)成克隆細(xì)胞群。陰性對(duì)照孔只加入培養(yǎng)基,24小時(shí)后細(xì)胞貼壁。陽(yáng)性對(duì)照組和陰性對(duì)照組均不加藥物索拉非尼,實(shí)驗(yàn)組加入不同濃度藥物索拉非尼。

克隆A(SCLC-1)細(xì)胞體積較小,數(shù)量最多,結(jié)構(gòu)致密;克隆體較大,邊界光滑清楚,細(xì)胞呈巢狀致密排列,約占單克隆生長(zhǎng)細(xì)胞孔的13% (2/15)。克隆B(SCLC-2)細(xì)胞呈梭形或多邊形,排列松散,邊界不規(guī)則,約占單克隆生長(zhǎng)細(xì)胞孔的87%(13/15)。

克隆A傳代后細(xì)胞分裂增殖旺盛,3-4天即可鋪滿培養(yǎng)瓶壁,連續(xù)傳代3月達(dá)20余代。克隆B傳代則需1周余才可鋪滿培養(yǎng)瓶壁,傳代6-8次后細(xì)胞毛糙,表面見(jiàn)金黃色顆粒物或褐色絮狀物。

加入MTT噻唑蘭檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制率結(jié)論:索拉非尼對(duì)克隆A細(xì)胞抑制率無(wú)明顯變化,索拉非尼對(duì)克隆B細(xì)胞抑制率有明顯變化。


02

Cellaview賽樂(lè)微的對(duì)照組實(shí)驗(yàn)


一般來(lái)說(shuō),實(shí)驗(yàn)室都是靠人工觀測(cè)記錄細(xì)胞生長(zhǎng)的,需要實(shí)驗(yàn)人員定期將培養(yǎng)中的細(xì)胞取出放在顯微鏡下進(jìn)行觀測(cè)并記錄相應(yīng)數(shù)據(jù)。一旦對(duì)照組數(shù)量增多,那么人工很難做到多組、同步進(jìn)行觀測(cè)記錄并記錄準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。而且,人工頻繁拿出細(xì)胞并觀測(cè)的操作,也很容易導(dǎo)致細(xì)胞污染,使得研究前功盡棄。

所以,為解決以上這些實(shí)際問(wèn)題,力顯智能研發(fā)團(tuán)隊(duì)綜合研發(fā)了這樣一款細(xì)胞智能監(jiān)控助——Cellaview賽樂(lè)微。它的核心優(yōu)勢(shì)在于它可以7x24小時(shí)的實(shí)時(shí)智能監(jiān)控并記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),且因?yàn)轶w積足夠小,能夠直接連同培養(yǎng)皿放進(jìn)培養(yǎng)箱,可以一邊培養(yǎng)一邊觀測(cè),再也不用擔(dān)心頻繁拿取會(huì)造成細(xì)胞污染了。


以秋水仙素對(duì)海拉細(xì)胞增殖抑制效果實(shí)驗(yàn)為例(30ng/ml濃度秋水仙素),可使用Cellaview賽樂(lè)微作如下對(duì)照實(shí)驗(yàn)。正常培養(yǎng)的海拉細(xì)胞為對(duì)照組、未加藥組(加入等體積30 ng/mLN(yùn)acl處理12h的Hela細(xì)胞)、加藥組(加入30 ng/ml秋水仙素給藥處理12h的Hela細(xì)胞),隨后同步放入培養(yǎng)箱,培養(yǎng)條件 95%CO?、5%O?,37℃。

實(shí)驗(yàn)結(jié)論:秋水仙素對(duì)海拉細(xì)胞增殖有著明顯的抑制效果,若想進(jìn)一步探究不同濃度秋水仙素對(duì)海拉細(xì)胞增殖的抑制程度,還需要進(jìn)一步作對(duì)比試驗(yàn)。

如上,Cellaview賽樂(lè)微很好滿足了對(duì)照組實(shí)驗(yàn)多組、同步、可保留數(shù)據(jù)的需求。Cellaview賽樂(lè)微的PC端后臺(tái)也可支持多達(dá)4臺(tái)儀器的同步連接,可以應(yīng)用于不同因素下對(duì)同種細(xì)胞的影響同因素下對(duì)不同細(xì)胞的影響的類型實(shí)驗(yàn),可為實(shí)驗(yàn)提供多組同步的對(duì)照參考依據(jù),給細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究帶來(lái)極大幫助。



Cellaview賽樂(lè)微完美適用于細(xì)胞劃痕、匯合度識(shí)別、類器官培養(yǎng)監(jiān)測(cè)、腫瘤球增殖監(jiān)測(cè)、胚胎干細(xì)胞生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)等大多數(shù)細(xì)胞生長(zhǎng)研究,為細(xì)胞質(zhì)量控制和監(jiān)控提供了極大幫助。






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