所使用相機(jī)主要參數(shù):sCMOS四百萬像素,2048x2048,pixel6.5um,成像有效面積13.3x13.3mm,幀率30fps,極限幀率100fps(搭配PCIe),量子效率82%@560nm。
水平方向20nm,垂直(z)方向50nm,三通道每個區(qū)域像素:738x345,每個通道視野范圍:48x22um,垂直(z)方向成像范圍1000nm。
力顯智能科技的iSTORM超高顯微鏡可實(shí)現(xiàn)3通道同時成像,分別是561、656、750三個通道,每通道激光照明功率不低于150mW,可實(shí)現(xiàn)0~100%調(diào)節(jié)。
力顯智能科技的iSTORM超高顯微鏡系統(tǒng)包含以下模塊:顯微鏡主體、三色成像系統(tǒng)、TIRF系統(tǒng)、激光和控制器系統(tǒng)、成像工作站。
可以的,可以使用商用顯微鏡的鎖焦系統(tǒng),z方向鎖焦精度在20-50nm;使用力顯三維鎖定系統(tǒng),z方向鎖定精度可以達(dá)到5nm。
算法經(jīng)過優(yōu)化后,iSTORM超高圖像可以實(shí)現(xiàn)實(shí)時重構(gòu),立等可得。
使用物理鎖定的方式,實(shí)時追蹤樣品上的一個基準(zhǔn)點(diǎn)的位置,并根據(jù)此移動樣品位置,補(bǔ)償樣品漂移。因?yàn)榛鶞?zhǔn)點(diǎn)可以在樣品制備之前加入,并且在成像過程中亮度保持穩(wěn)定,所以不會增加樣品制備的復(fù)雜性,可以在整個成像過程中保持樣品位置穩(wěn)定在1nm左右。
根據(jù)樣品及結(jié)構(gòu)的不同,成像時間也不同。結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的固定細(xì)胞可能要幾分鐘到十幾分鐘,活細(xì)胞成像最快可以幾秒鐘完成。
使用配置中的緩沖液和染料及照明光配合,可以使樣品上標(biāo)記的熒光染料“閃爍”,使得原始圖像上可以獲得單分子的熒光染料圖像,之后通過單分子定位原理,對每個亮點(diǎn)進(jìn)行位置擬合,并記錄在超高成像結(jié)果中。單個熒光點(diǎn)的定位精度與拍攝中獲得的熒光點(diǎn)光子數(shù)目有關(guān)系,一般情況下可以將分辨率提升10倍。
可以先用寬場成像,對樣品整體進(jìn)行快速掃描,找到目標(biāo)細(xì)胞后進(jìn)行超高成像。
針對固定的細(xì)胞我們有專用的雙通道和三通道成像緩沖液試劑盒,進(jìn)行單獨(dú)售賣。
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