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正常情況下，以雙通道為例，曝光時(shí)間30ms, 一邊拍以便進(jìn)行實(shí)時(shí)重構(gòu)，拍攝10000幀需要8--10min左右。如果先拍照后分析，曝光時(shí)間10ms為例，拍攝10000幀需要1min40s左右。

樣品最好是染色完成后,及時(shí)進(jìn)行拍照，樣本來不及拍照可以避光保存在4℃，保存時(shí)間不超過3天。

由于力顯智能科技的iSTORM產(chǎn)品所具備的20nm超高分辨率、2-3通道同時(shí)成像、界面友好、簡(jiǎn)單易用、系統(tǒng)穩(wěn)定性好、環(huán)境適應(yīng)性高等綜合特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)，使得它能夠幫助到更多科學(xué)家進(jìn)行衍射極限尺度以下的生物分子組織與相互作用等的尖端科學(xué)研究，已為包括香港科技大學(xué)、香港大學(xué)、中山大學(xué)、深圳大學(xué)、北京大學(xué)醫(yī)學(xué)院等在內(nèi)等超過50家科研小組和100位科研人員的科學(xué)研究的提供幫助，并獲得了高度認(rèn)可。

iSTORM技術(shù)采用在特定成像緩沖液中具有光切換特性的有機(jī)染料。理論上，與激光器波長(zhǎng)兼容的光切換染料均適用。但是，用戶應(yīng)該嚴(yán)格測(cè)試染料的光切換特性，例如染料在成像緩沖液中的亮/暗工作周期。每個(gè)周期釋放出的光子越多、亮/暗工作周期越低、切換次數(shù)越多的染料越合適。本手冊(cè)中提供的樣品制備方案均采用Alexa Fluorò 647 和Alexa Fluorò 750這一對(duì)熒光染料，這是目前最適合iSTORM雙通道成像系統(tǒng)的選擇。如果實(shí)驗(yàn)僅需要觀察一個(gè)目標(biāo)（即單通道），Alexa Fluorò 647是首選，因?yàn)橄啾?span>Alexa Fluorò 750，Alexa Fluorò 647 每個(gè)切換周期釋放出更多的光子，且具有更短的工作周期。

此外，諸如藍(lán)色吸收染料（Atto 488、Alexa 488、Atto 520）、黃色吸收染料Cy3B、紅色吸收染料（Alexa 647、Cy5、Dyomics 654、Atto680）和近紅外吸收Alexa 750等染料也都可以用來超高成像。

對(duì)生物結(jié)構(gòu)進(jìn)行特異性標(biāo)記可通過免疫染色（直接免疫染色法或間接免疫染色法）且以光切換染料標(biāo)記，也可以通過多肽或酶體（例如商業(yè)化產(chǎn)品SNAP-tag, CLIP-tag, 等等）標(biāo)記目標(biāo)蛋白。

適用于iSTORM系統(tǒng)的二抗已經(jīng)商業(yè)化且已被廣泛使用。用戶也可以考慮對(duì)一抗、FAB片段或者納米抗體進(jìn)行熒光標(biāo)記，由于熒光分子距離目標(biāo)蛋白更近，所以蛋白定位相比間接免疫熒光標(biāo)記法更加準(zhǔn)確。

iSTORM超高分辨率顯微鏡主要適用于實(shí)驗(yàn)室、研究所及醫(yī)院的實(shí)驗(yàn)與觀察。樣品廣泛適用于分子細(xì)胞生物學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、免疫學(xué)、藥理學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)固定的細(xì)胞、組織、細(xì)菌、酵母和病毒的研究，iSTORM活細(xì)胞版也可以進(jìn)行活細(xì)胞的相關(guān)成像。

熒光染料被激發(fā)進(jìn)入發(fā)射態(tài)，之后會(huì)進(jìn)入暗態(tài)（Dark state），在暗態(tài)中它們將與自由氧結(jié)合，進(jìn)入漂白狀態(tài)。在漂白狀態(tài)下，染料不會(huì)再次發(fā)出熒光。如果不讓染料與自由氧結(jié)合，它將無法進(jìn)入漂白狀態(tài)，一直維持在暗態(tài)。高功率的激發(fā)光可以使染料從暗態(tài)再次進(jìn)入發(fā)射態(tài)。這種從亮到暗再到亮的狀態(tài)切換看起來就像是染料在“閃爍”一樣。STORM通過隨機(jī)的分批“點(diǎn)亮”目標(biāo)分子來進(jìn)行超分辨定位。這樣每個(gè)活躍的熒光集團(tuán)都被分辨，它們的圖像與其他分子分開，不重疊。這樣確定了基團(tuán)的準(zhǔn)確位置，多次重復(fù)這個(gè)過程，每次隨機(jī)打開熒光基團(tuán)的不同亞基，得到圖像，確定每個(gè)亞基的位置后，把以上圖像重建成一張超高分辨率圖像。