一般來說,在做細胞實驗時會將一個實驗分為實驗組和對照組。實驗組是接受實驗變量處理的對象組;對照組相對實驗組而言,是不接受實驗變量處理的對象組。
理論上,因為實驗組和對照組受到無關(guān)變量的影響相同,所以實驗組和對照組的差異,即可認定是來自實驗變量的效果。實驗人員通過設(shè)置實驗組和對照組來加強實驗結(jié)果的可信度,這就要求盡量做到多組、同步進行實驗,并可保留相應(yīng)數(shù)據(jù)。
01對照組實驗案例
1、不同藥物對同種細胞的影響實驗。
用克隆形成實驗檢測嗎啡、舒芬太尼、布托啡諾對人肺癌細胞A549細胞株增殖的影響, 分別用不同濃度的嗎啡、舒芬太尼和布托啡諾處理A549細胞7d后,進行細胞克隆形成實驗。
實驗結(jié)果顯示,當嗎啡濃度為101umol/L時,A549細胞的增殖受到抑制,集落單位數(shù)目顯著少于對照組,結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義;其它濃度嗎啡對A549 細胞的增殖的影響不明顯。不同濃度的舒芬太尼、布托啡諾均顯示陰性結(jié)果,即不同濃度的舒芬太尼、布托啡諾未對A549細胞的增殖具有顯著影響。
2、同種藥物對不同種細胞的影響實驗。
為了比較索拉非尼對不同克隆細胞增殖抑制率,對不同細胞培養(yǎng)成克隆細胞群。陰性對照孔只加入培養(yǎng)基,24小時后細胞貼壁。陽性對照組和陰性對照組均不加藥物索拉非尼,實驗組加入不同濃度藥物索拉非尼。
克隆A(SCLC-1)細胞體積較小,數(shù)量最多,結(jié)構(gòu)致密;克隆體較大,邊界光滑清楚,細胞呈巢狀致密排列,約占單克隆生長細胞孔的13% (2/15)。克隆B(SCLC-2)細胞呈梭形或多邊形,排列松散,邊界不規(guī)則,約占單克隆生長細胞孔的87%(13/15)。
克隆A傳代后細胞分裂增殖旺盛,3-4天即可鋪滿培養(yǎng)瓶壁,連續(xù)傳代3月達20余代。克隆B傳代則需1周余才可鋪滿培養(yǎng)瓶壁,傳代6-8次后細胞毛糙,表面見金黃色顆粒物或褐色絮狀物。
加入MTT噻唑蘭檢測細胞增殖抑制率結(jié)論:索拉非尼對克隆A細胞抑制率無明顯變化,索拉非尼對克隆B細胞抑制率有明顯變化。
02Cellaview賽樂微的對照組實驗
一般來說,實驗室都是靠人工觀測記錄細胞生長的, 需要實驗人員定期將培養(yǎng)中的細胞取出放在顯微鏡下進行觀測并記錄相應(yīng)數(shù)據(jù)。一旦對照組數(shù)量增多,那么人工很難做到多組、同步進行觀測記錄并記錄準確數(shù)據(jù)。而且,人工頻繁拿出細胞并觀測的操作,也很容易導(dǎo)致細胞污染,使得研究前功盡棄。
所以,為解決以上這些實際問題,力顯智能研發(fā)團隊綜合研發(fā)了這樣一款細胞智能監(jiān)控助手——Cellaview賽樂微。它的核心優(yōu)勢在于它可以7x24小時的實時智能監(jiān)控并記錄細胞生長狀態(tài),且因為體積足夠小,能夠直接連同培養(yǎng)皿放進培養(yǎng)箱,可以一邊培養(yǎng)一邊觀測,再也不用擔(dān)心頻繁拿取會造成細胞污染了。
以秋水仙素對海拉細胞增殖抑制效果實驗為例(30ng/ml濃度秋水仙素),可使用Cellaview賽樂微作如下對照實驗。正常培養(yǎng)的海拉細胞為對照組、未加藥組(加入等體積30 ng/mLNacl處理12h的Hela細胞)、加藥組(加入30 ng/ml秋水仙素給藥處理12h的Hela細胞),隨后同步放入培養(yǎng)箱,培養(yǎng)條件 95%CO?、5%O?,37℃。
實驗結(jié)論:秋水仙素對海拉細胞增殖有著明顯的抑制效果,若想進一步探究不同濃度秋水仙素對海拉細胞增殖的抑制程度,還需要進一步作對比試驗。
如上,Cellaview賽樂微很好滿足了對照組實驗多組、同步、可保留數(shù)據(jù)的需求。Cellaview賽樂微的PC端后臺也可支持多達4臺儀器的同步連接,可以應(yīng)用于不同因素下對同種細胞的影響、同因素下對不同細胞的影響的類型實驗,可為實驗提供多組同步的對照參考依據(jù),給細胞實驗研究帶來極大幫助。
Cellaview賽樂微完美適用于細胞劃痕、匯合度識別、類器官培養(yǎng)監(jiān)測、腫瘤球增殖監(jiān)測、胚胎干細胞生長監(jiān)測等大多數(shù)細胞生長研究,為細胞質(zhì)量控制和監(jiān)控提供了極大幫助。
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參考文獻:
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[2] 文加斌. NCI-H446人小細胞肺癌細胞株細胞亞群克隆異質(zhì)性與腫瘤干細胞的實驗研究[D]. 遼寧:大連醫(yī)科大學(xué),2009. DOI:10.7666/d.y1557668.
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